Tableau d'histologie
| APPLICATION | AVANTAGE | INCONVENIENT | OBSERVATION | IMAGE | |
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Cryostat (s)(7µm à 40µm)Coupes de tissus fixés ou non fixés Congélation à l'azote liquide |
Immunomarquages en fluorescence ou enzymatique Hybridation in situ Coloration |
Technique rapide, de choix pour la mise en évidence d’antigène "difficiles", antigènes liposolubles…
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Technique difficile à maîtriser, coupes souvent irrégulières Préservation morphologique variable selon les tissus, présence de cristaux de glace (trous) |
Microscopie photonique Microscopie à fluorescence (ApoTome) |
Coupe d'organe de Corti de rat
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Microtome (s)(4µm à 20µm)Coupes de tissus fixés Imprégnation en paraffine |
Coloration histologique Etude anatomo-pathologique Etude qualitative et quantitative, coupes sériées: analyse d'image et comptage. Immunohistochimie |
Morphologie++ Technique de choix pour toutes les colorations histologiques |
Immunohistochimie : 1- Antigènes sensibles à la chaleur 2- A la déshydratation 3- Aux réactions chimiques (précipitation lipidique…) 4- A l’inclusion et la polymérisation en paraffine (démasquage indispensable) Inclusion lourde, automate à inclusion indispensable Immunofluorescence non adaptée (bruit de fond) |
Microscopie photonique Scanner de lames - Nanozoomer |
coupe de genou de souris
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Ultramicrotome (s)(0,25µm à 2µm)Coupes de tissus fixés Imprégnation en résine epoxy (50nm à 100nm) |
Microscopie photonique coupe fine de 1µm 1-Contraste des structures au bleu de toluidine 2-Etude qualitative et quantitative, coupes sériées : analyse d'images et comptage Microscopie électronique à transmission (MET) 1-Immunomarquages des structures fines en MET: « Pre-embeding et Post-embedding » |
Seule technique histologique permettant d’observer au niveau ultrastructural Morphologie +++ Pour l'immunomarquage : nécessité d'une mise au point en fonction des tissus |
Technique longue a mettre en œuvre Paramètres de préparation à respecter strictement Nécessite un technicien(ne) expérimenté(e) |
Microscopie photonique MET Scanner de lames-Nanozoomer |
Immunocytochimie ultrastructurale en pré-embedding (réalisé avant enrobage en résine Epoxy)
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Vibratome (s)(50µm à 500µm)Coupes épaisses de tissus fixés ou vivants Possible imprégnation en gélose pour des petites pièces |
Immunomarquages en fluorescence Hybridation in situ Electrophysiologie (patch-clamp…) Culture : explants Préparation de coupes pour l\'inclusion en MET |
Coupes très épaisses (50µm à 500µm) Coupes sur tissus vivants (cuve refroidissante à 4°C) ou sur tissus fixé Très bonne morphologie Immunofluorescence ++ Reconstitution en 3D |
Technique de coupe difficile à maitriser: Mise au point selon les tissus Difficultés de coupes pour les spécimens de dureté hétérogène Problèmes de pénétration des anticorps sur coupes épaisses Démasquages des sites antigéniques |
Microscopie Confocal en 3D Microscopie bi-photonique |
Coupe de crête vestibulaire de rat (photo de Aurore Brugeaud)
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